《大卫》是学院美术馆的镇馆之宝，也是米开朗基罗成名作，1501 年，米开朗基罗向佛罗伦萨城主索要到一块报废的巨石，经过三年的努力，于1504年完成了《大卫》雕像，该作品被誉为"西方艺术史上最完美男性人体"，他也因此声名大噪。这座雕像高5.17米，由一整块大理石雕刻而成，展现了以色列之王大卫与巨人歌利亚决战前的姿态，将人体的完美比例和力量感展现得淋漓尽致，是文艺复兴时期雕塑艺术的杰出代表。
佛罗伦萨学院美术馆共由7个展厅构成，空间布局紧凑而有序。一层主要展示米开朗基罗的雕塑作品，包括著名的《大卫》以及《奴隶》等，二层则主要展示绘画作品，涵盖了15至16世纪佛罗伦萨画派的众多经典之作，如波提切利、提香等画家的作品，此外还陈列着一些挂毯、乐器等文物。
